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Température du four de GC et son effet sur la chromatographie |
Lors de la réalisation d'une chromatographie il y a 2 options pour la température du four. Ou bien en isotherme, qui est défini comme une température constante pour la totalité de l'élution, ou bien en programmation de température. Ce qui est le cas lorsque la température change au cours de l'élution. La température peut être changée et augmentée avec un taux constant et régulier , ou bien en augmentant à une température particulière pendant une temps défini. Ces différences de températures du four auront des effets distincts sur l'élution des composés.
En suivant les effets de la température sur des colonnes non polaires en isotherme, nous remarquons qu'une augmentation de température a deux effets sur le chromatogramme. (voir figure 1). Le temps d'analyse est plus court et la résolution diminuée. Bien plus il y a un compromis entre la température du four qui peut être programmée et la résolution souhaitée. En règle générale une différence de 2°C des points d'ébullition entre les composés sera suffisante pour les séparer.
Un programme de température peut être utile par rapport à ce compromis, et permet à l'utilisateur d'augmenter la température à certains intervalles pour obtenir la résolution souhaitée avec des temps d'analyse plus courts. La méthode la plus simple pour savoir si la température peut être augmentée est de calculer la résolution de deux pics. La figure 2 montre l'équation de la résolution. Une valeur de R supérieure à 2 signifie que les deux pics sont bien séparés et peuvent être plus proches dans l'élution tout en maintenant une bonne résolution. Dans ces conditions la température peut être augmentée tout en garantissant une bonne séparation dans un temps réduit.
Bien que l'utilisation de cycles de températures pendant une analyse chromatographique simple puisse être bénéfique pour réduire le temps d'analyse, celui ci diminue aussi la longévité de la colonne. Comme déjà mentionné, des températures élevées permettent de réduire le temps d'analyse, mais augmentent le ressuage de la colonne. Une augmentation du ressuage diminue la vie de la colonne, attendu que ce bleeding représente de la phase qui est enlevée de la colonne. Dans ces conditions la température limite de la colonne doit être prise en compte lors de la mise au point de l'élution.
Les éléments rapportés ci-dessus sont valables seulement dans le cas d'une colonne non polaire puisque la séparation des composés repose sur les points d'ébullition. De plus un changement des températures n'affecte pas l'ordre d'élution des composés. Lors de l'utilisation de colonnes semi polaires ou polaires (pour lesquelles la séparation repose sur la polarité des composés) un changement de température affecte l'ordre d'élution des composés.
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